艾杰爾色譜柱是色譜技術(shù)的核心部件,在化學(xué)分析、生物醫(yī)藥、環(huán)境監(jiān)測(cè)等眾多領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用,利用不同物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間分配系數(shù)、吸附能力、分子大小等差異,實(shí)現(xiàn)混合物的分離。當(dāng)流動(dòng)相攜帶樣品通過(guò)時(shí),各組分與固定相相互作用不同,在柱中遷移速度有別,從而分離開(kāi)并依次流出,達(dá)到分析或制備目的。
艾杰爾色譜柱的常見(jiàn)類型有哪些?
1.按分離機(jī)制分類
-分配型:基于樣品組分在固定液(固定相)和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)差異進(jìn)行分離。例如,在反相分配色譜中,常用非極性固定相(如C18烷基鍵合硅膠)和極性流動(dòng)相(如水與有機(jī)溶劑的混合液),適用于分離極性較強(qiáng)的化合物,像生物大分子、有機(jī)酸等。
-吸附型:借助固定相(如活性氧化鋁、硅膠等)對(duì)不同物質(zhì)吸附能力的差異實(shí)現(xiàn)分離。硅膠吸附色譜柱常用于分離極性較小的有機(jī)化合物,根據(jù)物質(zhì)極性大小,極性強(qiáng)的組分吸附牢固,移動(dòng)慢;極性弱的吸附松,移動(dòng)快。
-離子交換型:通過(guò)固定相(離子交換樹(shù)脂或離子交換凝膠)上的可交換離子與樣品中的離子進(jìn)行交換,依據(jù)離子交換親和力不同分離離子型化合物。比如,在分析氨基酸時(shí),可根據(jù)氨基酸所帶電荷不同,選擇合適的離子交換色譜柱進(jìn)行分離。
-凝膠型:以多孔性凝膠(如葡聚糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)為固定相,基于樣品分子的尺寸大小差異進(jìn)行分離。小分子可進(jìn)入凝膠孔內(nèi),流程長(zhǎng),移動(dòng)慢;大分子被排斥在凝膠顆粒外,流程短,移動(dòng)快。常用于生物大分子(如蛋白質(zhì)、核酸)的分離純化,按分子量大小排序。
艾杰爾色譜柱使用注意事項(xiàng):
-流動(dòng)相要經(jīng)過(guò)過(guò)濾和脫氣處理,防止雜質(zhì)堵塞色譜柱或產(chǎn)生氣泡影響分離效果。
-樣品也要進(jìn)行預(yù)處理,如過(guò)濾、稀釋等,避免樣品中的雜質(zhì)損壞色譜柱。
-控制好流動(dòng)相的流速,流速過(guò)快可能降低分離效果,過(guò)慢則延長(zhǎng)分析時(shí)間。